Los personajes de Happy Tree Friends son animales antropomórficos de vivos colores cuyo hábitat natural es el bosque templado. La mayoría de ellos muestran dos grandes incisivos en la boca y narices rosas, pequeñas y en forma de corazón, similares a las de los osos amorosos. Los personajes interpretan papeles infantiles, juveniles o adultos dependiendo de cada episodio. Las excepciones son Pop y Cub, que siempre hacen de padre e hijo y Lumpy, que siempre hace de adulto y además es morfológicamente diferente a los demás personajes (es un alce color azul claro con un cuerno torcido). Hay personajes, como Cuddles o Toothy, cuya personalidad está poco definida ^{[cita requerida]} y que suelen aparecer en todo tipo de situaciones a lo largo de la serie. Otros personajes tienen características más específicas las cuales son, en multitud de ocasiones, la causa de los desastres y desgracias que ocurren a los personajes, como la ceguera de The Mole o los superpoderes de Splendid. Otros personajes de esta serie son Nutty, con su locura por los dulces; Flippy, el soldado que siempre enloquece y se despierta en él un instinto asesino; Mime, que es mudo,petunia, Giggles,grandes amigas, Flaky que le tiene miedo a todo, Disco Bear un gran fan de la musica, Lifty y Shifty, que siempre aparecen juntos, Handy el castor de pequeñas patas y Russell el pirata.